Las imágenes de células vivas requieren microscopiosque minimizan la fototoxicidad, mantienen la viabilidad celular y proporcionan imágenes de alta resolución con el tiempo. Las opciones comunes incluyen:
1. Microscopios de fluorescencia invertidos:
Microscopios de campo ancho: equipados con controles ambientales (temperatura, CO₂, humedad) y cámaras sensibles (por ejemplo, SCMOS). A menudo emparejado con contraste de fase o DIC (contraste de interferencia diferencial) para imágenes sin etiquetas.
Confocal del disco giratorio: reduce el foto -blanqueo con un escaneo más rápido en comparación con el confocal de escaneo láser tradicional. Ideal para procesos dinámicos.
2. Microscopía de fluorescencia de lámina de luz (LSFM):
Ilumina solo el plano focal, reduciendo drásticamente la exposición a la luz y permitiendo imágenes a largo plazo (por ejemplo, horas a días).
3. Microscopía de dos fotones:
Utiliza luz infrarroja cercana para una penetración de tejido más profunda y una fototoxicidad reducida, adecuada para muestras gruesas como cultivos 3D.
4. TIRF (fluorescencia total de reflexión interna):
Visualiza eventos en elmembrana celular(por ejemplo, tráfico de vesículas) mediante la imagen de una sección óptica delgada (~ 100 nm).
5. Microscopios de super resolución (por ejemplo, STED, SIM):
Lograr una mayor resolución, pero requiere una optimización cuidadosa para equilibrar la exposición a la luz y la salud celular.
6. Sistemas optimizados de células vivas:
Incorpore cámaras ambientales, ópticas adaptativas y detectores de baja luz (por ejemplo, cámaras EM-CCD).
Características clave para imágenes en vivo:
- Control ambiental: mantiene la temperatura, el Co₂ y la humedad.
- Adquisición rápida: minimiza el desenfoque de movimiento para procesos dinámicos.
- Baja fototoxicidad: los filtros, las fuentes de luz LED o la iluminación de la lámina de luz reducen el daño.
Elija basado en las necesidades de resolución, la duración de la imagen y la sensibilidad de la muestra.
